-
细粒棘球蚴谷胱甘肽s-转移酶重组抗原的高效融合表达、纯化及免疫特性的研究
-
作者:
李宗吉
黄瑾
张静
张焱
王洁
王淑静
高岭
赵巍
来源:
中国人兽共患病学报
年份:
2007
文献类型 :
期刊
关键词:
谷胱甘肽s
免疫印记
酶联免疫吸附试验
细粒棘球蚴
转移酶
免疫原性
-
描述:
目的 构建细粒棘球蚴重组蛋白谷胱甘肽s-转移酶(EgGST)的表达载体,获得纯化的重组蛋白,并对其免疫学特性进行初步鉴定,为重组疫苗研制的后续工作提供依据.方法 从本室已构建的重组质粒GST/pGEM-T中酶切下GST目的 片段,亚克隆入表达载体pET28a,转化入大肠杆菌BL21plys进行融合表达,经His-bind树脂纯化系统小量纯化,得到纯化的重组融合蛋白作为抗原.免疫ICR小鼠,获得抗血清.通过蛋白免疫印迹试验(Western blot)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测重组抗原的免疫学特性.结果 成功构建具有高效表达能力的基因工程菌株,并纯化了重组蛋白,纯化的重组抗原免疫小鼠的抗血清可识别天然与重组抗原,实验组血清与对照组血清抗体含量差异有统计学意义(P<0.05).结论 重组蛋白具有良好的抗原性和免疫原性.
-
细粒棘球蚴(中国大陆株)线粒体苹果酸脱氢酶重组蛋白的表达、纯化及免疫特性分析
-
作者:
张静
王洁
王淑静
张焱
高岭
赵巍
来源:
中国病原生物学杂志
年份:
2006
文献类型 :
期刊
关键词:
免疫鉴定
蛋白纯化
细粒棘球蚴
线粒体苹果酸脱氢酶(mMDH)
-
描述:
目的 对细粒棘球蚴(中国大陆株)线粒体苹果酸脱氢酶(Eg mMDH )重组质粒进行原核表达、纯化,并初步鉴定重组蛋白的免疫学特性. 方法 对已构建的基因工程菌株mMDH/pGEM-T/JM109进行酶切,获取目的基因.将目的基因重组到pET28a表达载体上,筛选阳性表达菌株并进行诱导表达,经SDS-PAGE鉴定重组mMDH蛋白质为包涵体后,超声破碎细胞,尿素溶解包涵体,镍柱亲和层析法纯化,获取重组蛋白.以纯化的mMDH作抗原免疫小鼠,用Western blot和ELISA方法检测重组蛋白的免疫原性及免疫鼠血清抗体水平. 结果 成功构建原核重组表达载体mMDH/pET28a/BL21,并纯化出浓度较高的重组蛋白.ELISA结果显示,重组抗原免疫小鼠诱导产生了一定水平的血清抗体;Western blot显示,原头蚴、囊液等天然抗原能被重组抗原免疫的小鼠血清识别. 结论 纯化后的重组蛋白mMDH具有较强的免疫原性,有望作为包虫病候选疫苗,值得进一步深入研究.
-
细粒棘球蚴重组14-3-3基因的表达、纯化及免疫学鉴定
-
作者:
黄瑾
李宗吉
张静
王淑静
王洁
张焱
高岭
赵巍
来源:
中国病原生物学杂志
年份:
2006
文献类型 :
期刊
关键词:
3
14
免疫鉴定
3蛋白
表达
纯化
细粒棘球蚴
基因克隆
-
描述:
目的 构建细粒棘球蚴14-3-3基因的重组质粒并原核表达、纯化该重组蛋白,对其免疫学特性进行初步鉴定. 方法 从重组质粒pGEM-T/Eg14-3-3中获取14-3-3基因,亚克隆于表达载体pET28a构建基因工程菌株,并表达、纯化重组蛋白,经Western blot、ELISA对该蛋白的免疫学特性进行初步研究. 结果 成功构建含目的片段14-3-3 的基因工程菌株;ELISA检测显示,用表达、纯化的重组蛋白免疫小鼠,诱导产生了特异性抗体,Western blot鉴定该抗体能识别重组抗原及原头蚴、囊液、囊壁抗原. 结论 构建的 pET28a/Eg 14-3-3菌株能高效表达14-3-3蛋白,初步鉴定该重组蛋白具有较好的抗原性和免疫原性.
-
重组质粒Eg.EF-1/pGEX-6P-1的构建及原核诱导表达
-
作者:
王健
赵嘉庆
王娅娜
丁淑琴
张焱
王洁
王淑静
高岭
赵巍
来源:
药物生物技术
年份:
2006
文献类型 :
期刊
关键词:
重组抗原
融合表达
延伸因子
细粒棘球蚴
-
描述:
将细粒棘球蚴(Echinococcus granulosus,Eg.)延伸因子(Elongation factor 1,E卜1)与pGEX-6P-1构建成重组质粒并进行表达、纯化及对其特性进行鉴定
-
胡敏酸在高岭土上的吸附行为
-
作者:
李爱民
朱燕
代静玉
来源:
岩石矿物学杂志
年份:
2005
文献类型 :
期刊
关键词:
红外光谱
吸附行为
热重分析
高岭土
胡敏酸
X衍射
-
描述:
研究了胡敏酸在高嶺土上的吸附行為,並運用X衍射、紅外光譜和熱重等分析方法,對複合前後的高嶺土進行分析。結果表明,連續洗滌6次後,可獲得穩定的胡敏酸-高嶺土複合體;胡敏酸在高嶺土上的吸附符合Fruendlich吸附模式,K(下標 f)為0.857;高嶺土-胡敏酸複合體的紅外光譜出現了明顯的C-H振動吸收峰;吸附行為主要表現為化學吸附,發生在鋁的表面羥基吸附位上。
-
胡敏酸在高岭土上的吸附行为
-
作者:
李爱民
朱燕
代静玉
来源:
矿物岩石
年份:
2005
文献类型 :
期刊
关键词:
红外光谱
吸附行为
热重分析
高岭土
胡敏酸
X衍射
-
描述:
研究了胡敏酸在高岭土上的吸附行为,并运用X衍射、红外光谱和热重等分析方法,对复合前后的高岭土进行分析。结果表明,连续洗涤6次后,可获得稳定的胡敏酸高岭土复合体;胡敏酸在高岭土上的吸附符合Fruendlich吸附模式,Kf为0.857;高岭土胡敏酸复合体的红外光谱出现了明显的C―H振动吸收峰;吸附行为主要表现为化学吸附,发生在铝的表面羟基吸附位上
-
细粒棘球蚴中国大陆株亲肌肉抗原重组蛋白的表达、纯化及免疫学鉴定
-
作者:
马锐
师志云
于晶晶
王淑静
王洁
张焱
高岭
赵巍
来源:
宁夏医科大学学报
年份:
2008
文献类型 :
期刊
关键词:
局部放电
换流变压器
交接试验
-
描述:
目的 对细粒棘球蚴中国大陆株亲肌肉基因(myophilin)的重组质粒进行原核表达、纯化,并初步鉴定重组蛋白的免疫学特性,为重组疫苗研制的后续工作提供依据。方法 对已构建的基因工程菌株myophilin/pGEM-T/JM109进行酶切,获取目的基因。将目的基因亚...
-
细粒棘球蚴中国大陆株亲肌肉基因分子克隆和序列分析
-
作者:
张静
赵嘉庆
王娅娜
张焱
王淑静
王洁
高岭
赵巍
来源:
宁夏医学院学报
年份:
2006
文献类型 :
期刊
关键词:
克隆
亲肌肉基因
序列分析
细粒棘球蚴
-
描述:
目的获得细粒棘球蚴(E.granulosus)亲肌肉基因(myophilin)序列并进行序列分析.方法从包虫病患者体内获取细粒棘球蚴原头蚴提取总RNA,根据GeneBank公共数据库检索出细粒棘球蚴亲肌肉基因的已知序列设计一对引物,采用RT-PCR技术扩增出细粒棘球蚴中国大陆株亲肌肉基因,将其克隆到pGEM-T载体,进行序列测定和分析.结果成功扩增出细粒棘球蚴中国大陆株亲肌肉基因,测序表明该基因为573bp;该基因序列与检索基因核苷酸序列相比,同源性为100%,推导编码氨基酸序列同源性为100%.结论测序的亲肌肉基因序列有完整的编码框,可做为包虫病重组抗原的候选基因.
-
细粒棘球蚴重组延伸因子-1抗原的免疫原性研究
-
作者:
王健
王娅娜
丁淑琴
张焱
王洁
王淑静
高岭
赵巍
来源:
宁夏医学院学报
年份:
2006
文献类型 :
期刊
关键词:
1
免疫印记
酶联免疫吸附试验
重组细粒棘球蚴EF
免疫原性
-
描述:
目的 对细粒棘球蚴重组抗原EF-1的免疫原性进行初步鉴定,为重组疫苗研制的后续工作提供依据。方法用重组目的蛋白及融合表达蛋白作为抗原,分别免疫昆明小鼠获得抗血清,通过蛋白免疫印迹试验(Western blot)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清...
-
旅踪屐痕
-
作者:
钟振振
王邦建
丘海洲
符琼柏
周玉琛
胡迎建
林崇增
慕立功
秦中吟
林文颂
王俊锋
廖奇才
李静凤
郑保钟
郑义千
林星煌
胡喜成
王秋亭
孙有瑄
吴儒品
王秀孔
王镇宁
杨志清
魏敬之
李立命
曾虹
于庆丰
方元满
王善同
翁德生
米韶华
李更文
毕振东
李武祥
杨玉保
谭笑
田在玉
陈重云
向福初
林小玉
蒋达海
李筠英
周本正
徐增焱
刘金汤
王纪曾
李玉臻
来源:
诗词月刊
年份:
2008
文献类型 :
期刊
关键词:
横卧
大学城
三台阁
诗词
里山
世外
西江月
白云
画图
月刊
-
描述:
悠然安坐,玉池流彩潺潺。蓝空雪岭竞相妍,人醉黄龙仙苑。信步松亭回望,群峰惊显奇观,美人静卧展芳颜,招引轻云几片。胡迎建浮梁瑶里行赣东北界有瑶里,黄山为邻高岭趾。林海茶乡瓷之源,今我得见惊其美。雨狂泼后